提升DNA原位合成質(zhì)量秽荤，聚丙烯微孔膜等離子體設(shè)備活化處理

基因芯片又稱為寡核苷酸微陣列，它是借助定點固相合成技術(shù)或探針固定化技術(shù)柠横，將一系列不同序列的寡核苷酸按陣列分布固定在固相載體上窃款。

目前用作DNA微陣列原位合成的載體多為玻璃片和硅片，而聚丙烯膜牍氛、尼龍膜等高分子微孔膜晨继，則大多用于點樣法生物芯片的制備，這類膜作為芯片載體熒光背景強搬俊，過去必須采用同位素檢測紊扬，因而不為人們所青睞蜒茄。

等離子體引發(fā)接枝是近年來出現(xiàn)的一種新型修飾方法，它能在短時間(數(shù)秒到幾分鐘)內(nèi)通過輝光放電形成等離子體餐屎，直接將所需的功能基團接枝到膜上檀葛，與傳統(tǒng)方法相比，具有工藝簡單腹缩、操作方便.基膜和接枝單體選擇范圍廣等優(yōu)點屿聋。

選擇微孔聚丙烯膜作為DNA芯片原位合成的載體，在氫氣藏鹊、氮氣混合氣氛中對該膜進行等離子體處理润讥，經(jīng)真空全反射紅外光譜、X射線光電子能譜表征盘寡，證實在微孔聚丙烯膜上直接接枝了大量氨基楚殿。

等離子體接枝氨基效果的主要因素有處理時間和放電功率。如果膜片上一分子氨基與一分子的寡核苷酸發(fā)生偶聯(lián)反應(yīng)竿痰，隨后所進行的脫DMT反應(yīng)就有一分子的DMT被脫除下來勒魔，而DMT的稀溶液在酸性介質(zhì)中符合郎伯-比爾定律，且在498nm左右有大吸收峰菇曲。

等離子體處理后表面變粗冠绢、孔徑變大而清晰，這是由于等離子體中的離子常潮、激發(fā)態(tài)分子和自由基等各種能量的粒子與材料表面進行多種相互作用弟胀，即利用H2和N2的等離子體進行表面反應(yīng)，參與反應(yīng)的有激發(fā)態(tài)分子喊式、自由基和離子孵户，也包括等離子體輻射紫外光的作用，通過表面反應(yīng)在表面引入了氨基岔留，并產(chǎn)生表面侵蝕夏哭，形成交聯(lián)結(jié)構(gòu)層或表面自由基。

這些結(jié)果進一步說明膜表面已接枝了氨基献联，至于酰胺基團的引入竖配，則可能是等離子體處理后膜表面產(chǎn)生了活性自由基，進一步與空氣中的氧作用的結(jié)果里逆。還可以知道进胯，直接轟擊面吸收峰帶明顯比另一面強，表明其上接枝氨基的量較多原押。等離子體處理過程中既引入了含氮基團氨基又引入了酰胺基胁镐。

等離子體可在微孔聚丙烯膜上引發(fā)接枝氨基，用該方法改性的基材可直接進行DNA原位合成。從DMT溶液的紫外吸光度值和偶聯(lián)效率來看盯漂，明顯比目前使用的用氨基修飾的玻璃片基高颇玷，表明其合成的DNA探針密度遠高于功能化玻璃，再加之其易于加工就缆，有望成為一類DNA原位合成的新基材帖渠。